Giải pháp chuyển gen vào tế bào một cách nhẹ nhàng cho các ứng dụng kỹ thuật tế bào T
Hệ thống chuyển gen CellPore™ mở ra những khả năng mới trong việc chỉnh sửa tế bào T thông qua phương pháp đưa vật liệu di truyền trực tiếp vào tế bào chất. Hệ thống bao gồm một thiết bị để bàn và bộ kit chuyên dụng, trong đó có các cartridge sử dụng một lần. Công nghệ vi lỏng tiên tiến của CellPore™ giúp chuyển nạp mRNA và ribonucleoprotein (RNP) để chỉnh sửa gen vào tế bào T chưa được hoạt hóa (unactivated T cells), với khả năng bảo toàn kiểu hình tế bào T ở trạng thái nghỉ. Các tế bào đã được chỉnh sửa có thể được sử dụng cho các phân tích và ứng dụng tiếp theo.
Hệ thống chuyển gen hoạt động như thế nào?
CellPore™ sử dụng công nghệ vi lỏng để đưa các mRNA và RNP mục tiêu trực tiếp vào tế bào chất của tế bào T chưa kích hoạt. Quá trình này sử dụng áp lực để đẩy tế bào qua các kênh vi lỏng song song với tốc độ cao, tạo ra các lỗ tạm thời trên màng tế bào cho phép vật chất đi vào trước khi màng được tái cấu trúc.
Ưu điểm của hệ thống chuyển gen CellPoreTM:
- Chỉnh sửa gen trên các tế bào T chưa kích hoạt mà không gây rối loạn gen hoặc thay đổi chức năng không mong muốn so với phương pháp điện biến nạp.
- Chuyển nạp mRNA và RNP trực tiếp vào tế bào chất trong khi vẫn giữ nguyên kiểu hình tế bào T ở trạng thái nghỉ.
- Dễ dàng điều chỉnh thông số thiết bị để tối ưu hóa điều kiện chuyển nạp một cách nhanh chóng.
Hình 1. Hiệu quả chuyển nạp tối ưu (A) CellPore FITC-Dextran hoặc (B) mCherry và eGFP mRNA được chuyển 2x106 tế bào T chưa hoạt hóa thông qua việc chuyển/biểu hiện tối ưu được đo ở mức 70 – 90 psi. Cas9 RNP nhắm mục tiêu (C) gen β-2-microglobulin (B2M) được đo hiệu quả chỉnh sửa gen tối ưu ở điều kiện 90 psi. Tất cả các điều kiện được đánh giá bằng FACS. Dữ liệu dạng trung bình ± SD (n = 2 – 5).
Hình 2. Các tế bào T chưa kích hoạt xử lý qua CellPore™ duy trì mức tiết cytokine cơ bản, trong khi các mẫu sử dụng điện chuyển nạp có sự tăng đáng kể cytokine viêm sau 24 giờ chuyển gen. Dữ liệu dạng trung bình ± SD (n = 3).
Thông tin đặt hàng:
Hệ thống chuyển gen CellPore™ (CellPore™ Transfection System), catalog #100-0946
Bộ kit chuyển gen (CellPore™ Transfection Kit 300), catalog #100-1020
