Đang cập nhật
Tổng quan về bộ môi trường biệt hóa Organoid ruột IntestiCult™:
Bộ Môi Trường Biệt Hóa Organoid Ruột IntestiCult™ (Người) là môi trường nuôi cấy hoàn chỉnh hỗ trợ biệt hóa thêm các cơ quan ruột ở ba chiều (3D) hoặc ở 2D dưới dạng các lớp đơn hoặc nuôi cấy bề mặt không khí-lỏng (ALI). Các nuôi cấy ban đầu có thể là các organoid ruột có nguồn gốc từ các hốc ruột người hoặc các organoid đã được chuyển gen đã được nuôi cấy bằng Môi trường tăng trưởng organoid IntestiCult™ (Người; Catalog #06010).
Các mẫu nuôi cấy ruột được tạo ra bằng Môi trường biệt hóa organoid IntestiCult™ (Người) chứa các tỷ lệ liên quan về mặt sinh lý của các quần thể tế bào gốc và biệt hóa, tái hiện sự đa dạng của trục hốc-lông nhung. Khi so sánh với các dòng tế bào thông thường, các lớp đơn ruột thể hiện tính toàn vẹn của hàng rào lớn hơn, biểu hiện mức độ cao hơn của các dấu hiệu biệt hóa quan trọng và có hình thái đại diện nhiều hơn cho ruột trong cơ thể sống.
Các ứng dụng của nuôi cấy organoid ruột bao gồm nghiên cứu sự phát triển và chức năng của biểu mô ruột, mô hình hóa các bệnh đường ruột, sàng lọc hợp chất và các tiếp cận liệu pháp tái tạo. Các nuôi cấy đơn lớp ruột và ALI đặc biệt phù hợp với các xét nghiệm tính thấm và nghiên cứu về các bệnh truyền nhiễm do dễ tiếp cận bề mặt đỉnh của tế bào. Bộ kit này yêu cầu IntestiCult™ Organoid Growth Medium (Người; Catalog #06010) để bắt đầu và mở rộng các organoid ruột trước khi biệt hóa.
Tính năng nổi bật:
Cho phép tạo ra các mẫu nuôi cấy organoid ruột với tỷ lệ sinh lý của các quần thể tế bào gốc và tế bào biệt hóa
Cho phép dễ dàng tiếp cận bề mặt đỉnh bằng cách chuyển đổi các cơ quan ruột thành các nuôi cấy đơn lớp và ALI
Tạo ra kết quả nhất quán qua các lần cấy chuyền và các mẫu lặp lại
Ứng dụng: Nuôi cấy tế bào, Biệt hóa, Mở rộng, Duy trì, Nuôi cấy organoid
Thành phần bộ kit:
HepatiCult™ Organoid Kit (Human) (Catalog # 100-0214) bao gồm:
IntestiCult™ ODM Human Basal Medium (Catalog # 100-0212), 50 mL
Organoid Supplement (Catalog #100-0191), chai 50 mL
Dữ liệu:
Hình 1. Các cơ quan ruột người biệt hóa thể hiện hình thái nảy chồi
(A) Các organoid được nuôi cấy trong IntestiCult™ OGM chủ yếu là nang (cystic). (B) Khi chuyển sang IntestiCult™ ODM, các organoid phát triển biểu mô dày với hình thái nảy chồi rõ rệt, biểu thị trạng thái biệt hóa cao hơn. Hình ảnh các organoid được chụp vào ngày thứ 5 của quá trình mở rộng hoặc biệt hóa tương ứng.
Hình 2. Các organoid ruột chứa tỷ lệ cao hơn các loại tế bào trưởng thành sau khi biệt hóa trong IntestiCult™ ODM
(A, B) Các organoid nuôi cấy trong IntestiCult™ OGM được làm giàu cho các tế bào tăng sinh Ki-67+ (A), trong khi chứa một số loại tế bào biệt hóa như tế bào hình đài (MUC2, A), tế bào ruột (KRT20, B) và tế bào nội tiết ruột (CHGA, B). (C, D) Khi chuyển sang IntestiCult™ ODM, các organoid chứa một số lượng nhỏ tế bào tăng sinh Ki-67+ (C, mũi tên), với tỷ lệ sinh lý nhiều hơn của các tế bào hình đài (MUC2, C), tế bào ruột (KRT20, D) và tế bào nội tiết ruột dương tính với chromogranin A- (CHGA-) (D, mũi tên).
Hình 3: Biệt hóa biểu mô ruột ở bề mặt khí-lỏng (ALI) bằng IntestiCult™ ODM
(A – E) Nuôi cấy các lớp đơn có nguồn gốc từ organoids dưới dạng nuôi cấy ALI thúc đẩy sự biệt hóa hơn nữa của các nuôi cấy biểu mô ruột như được thấy bằng những thay đổi trong biểu hiện gen được đo bằng RT-qPCR. Định lượng tương đối (RQ) cho từng dấu hiệu được hiển thị so với gen quản lý actB và TBP và được chuẩn hóa đối với các cơ quan chưa biệt hóa được nuôi cấy trong IntestiCult OGM (Người). Các dấu hiệu tiền thân (A) Lgr5 và (B) Axin2 giảm đáng kể trong cả lớp đơn chìm và nuôi cấy ALI, trong khi các dấu hiệu của tế bào ruột (KRT20, C), tế bào hình đài (MUC2, D) và tế bào nội tiết ruột (CHGA, E) tăng đáng kể. Giảm thêm Axin2 được thấy trong lớp đơn ALI với sự gia tăng biểu hiện của KRT20, MUC2 và CHGA. (F, G) So sánh các mặt cắt ngang của lớp đơn organoid được nuôi cấy trong IntestiCult™ ODM dưới dạng (F) nuôi cấy chìm hoặc (G) tại ALI cho thấy sự biệt hóa thêm của biểu mô ruột với tỷ lệ tăng các tế bào hình đài và chất nhầy ngoại bào (MUC2, màu xanh lá cây).
