Tùy thuộc vào mức độ phát triển của các khuẩn lạc, các bước sau đây có thể giúp kéo dài thời gian thực hiện xét nghiệm CFU:
Duy trì độ ẩm: Đảm bảo tủ ấm có nhiều nước trong khay, sử dụng các đĩa chứa bổ sung xung quanh đĩa 35 mm và thêm các đĩa nước mở để duy trì độ ẩm. Đọc thêm về cách duy trì độ ẩm trong xét nghiệm CFU.
Giảm tốc độ tăng trưởng các khuẩn lạc: Đặt các mẫu xét nghiệm CFU trong tủ ấm ở nhiệt độ 33°C để làm chậm sự tăng trưởng khuẩn lạc, đồng thời duy trì mức CO₂ phù hợp. Điều này giúp bảo quản các khuẩn lạc cho đến khi có thể đếm chúng. Nếu các cụm tế bào đã đạt 12-14 ngày (đối với mẫu người) hoặc sau ngày thứ 6 (đối với mẫu chuột hoặc chuột cống), việc chuyển sang 33°C có thể kéo dài khả năng đếm khuẩn lạc lên đến 7 ngày, tùy thuộc vào nguồn tế bào (trung bình từ 3-5 ngày).
Lưu ý: Không đặt các mẫu CFU ở 4°C, vì điều này sẽ làm tan methylcellulose và không thể đếm được các khuẩn lạc trong xét nghiệm. Tốt nhất là giữ chúng ở trạng thái ngậm nước nhiều nhất có thể và duy trì ở 33°C để làm chậm sự phát triển.
Mặc dù không thể đảm bảo rằng các bước này sẽ giúp ích cho các xét nghiệm CFU có thời gian phát triển dưới 12 - 14 ngày, nhưng có thể đáng để thử nếu không có giải pháp thay thế. Vui lòng tham khảo trang web của STEMCELL Technologies để biết thêm thông tin về các sản phẩm môi trường gốc methylcellulose MethoCult™ được tối ưu hóa cho các xét nghiệm CFU tạo máu ở người, chuột và chuột cống.
Để được hỗ trợ và thông tin thêm, vui lòng liên hệ với Biogroup.
Khóa học xét nghiệm CFU tạo máu chuột theo yêu cầu
Tìm hiểu cơ bản về quá trình tạo máu ở chuột, cách thiết lập xét nghiệm CFU trong phòng thí nghiệm và phân loại, đếm các cụm tế bào một cách tự tin với các bài giảng trực tuyến và video thí nghiệm từng bước trong khóa học miễn phí này.
Khóa học xét nghiệm CFU tạo máu của người theo yêu cầu
Tham gia khóa học trực tuyến miễn phí này để tìm hiểu các khái niệm chính về sinh học tế bào gốc và tế bào tiền thân tạo máu (HSPC) và cách thiết lập thành công xét nghiệm CFU trong phòng thí nghiệm.
Phát hiện và định lượng tế bào tiền thân tạo máu trong xét nghiệm đơn vị hình thành khuẩn lạc (CFU)
MethoCult™ là dòng môi trường nuôi cấy gốc methylcellulose bán rắn được tạo ra để thúc đẩy sự phát triển và biệt hóa tối ưu của các tế bào tiền thân tạo máu trong nuôi cấy. MethoCult™ là “Tiêu chuẩn vàng” để phát hiện và định lượng các tế bào tiền thân tạo máu trong ống nghiệm trong xét nghiệm đơn vị hình thành khuẩn lạc (CFU) hoặc xét nghiệm tế bào hình thành khuẩn lạc (CFC), còn được gọi là xét nghiệm methylcellulose. Có nhiều công thức môi trường nuôi cấy MethoCult™ cho các xét nghiệm CFU với các tế bào tạo máu từ mô người và chuột. Một số công thức cũng có thể được sử dụng với các tế bào tạo máu có nguồn gốc từ tế bào gốc đa năng của người (hPSC) hoặc từ các loài khác, cụ thể là chuột, linh trưởng không phải người và chó.
Xem tất cả môi trường MethoCult™ >
ĐƯỢC CHUẨN HÓA VÀ KIỂM SOÁT CHẤT LƯỢNG. Được chế biến bằng các thành phần được sàng lọc cẩn thận.
NHẤT QUÁN. Kiểm tra hiệu suất nghiêm ngặt, đảm bảo khả năng tái tạo vượt trội từ lô này sang lô khác.
TIỆN LỢI. Có sẵn trong các công thức pha sẵn để xác định và liệt kê tổng số CFU, hồng cầu (CFU-E và BFU-E), bạch cầu hạt/đại thực bào (CFU-GM, CFU-G và CFU-M) và tiền thân đa dòng (CFU-GEMM).
LINH HOẠT. Có sẵn trong các công thức cho phép nhà nghiên cứu thêm các thành phần tùy chọn. Các công thức và kích cỡ tùy chỉnh có sẵn theo yêu cầu.
Nguồn:
https://www.stemcell.com/technical-resources/extending-the-life-of-a-cfu-assay.html
https://www.stemcell.com/products/brands/methocult-hematopoietic-colony-assay.html
