Cách Ngăn Ngừa Vỡ Túi Đông Lạnh
Khuyến nghị trong việc xử lý để giảm tỷ lệ vỡ túi đông lạnh
Thận trọng: Tất cả các túi đông lạnh đều có thể bị vỡ trong khi đông lạnh. Vật liệu EVA, EVO, FEP hay mọi chất liệu túi dẻo đều có thể bị vỡ khi đông cứng. Khách hàng nên xem kỹ hướng dẫn bên dưới để giảm thiểu tình trạng hỏng túi CryoStore.
Một số khuyến nghị từ hãng Origen:
- Hàn ngắn ống dẫn
- Đuổi khí
- Sử dụng đúng Cassette
- Xử lý cẩn thận
- Sử dụng đúng chất bảo vệ lạnh
- Hiểu rõ về sự trao đổi chất của tế bào
HÀN NGẮN ỐNG DẪN
Đây là nguyên nhân làm vỡ túi phổ biến nhất.
Ống dẫn phải được hàn kín thấp hơn các cổng Spike và càng gần khớp ống càng tốt (xem ảnh bên phải). Việc này giúp bảo vệ ống khỏi các tác động nếu túi bị trượt trong cassette khi bảo quản lạnh. Ngược lại, đoạn ống dài sẽ hoạt động giống như một cái đòn bẩy và bất kỳ tác động nào lên ống dẫn đang đông cứng đều có thể làm nó đứt ra ở khớp túi.
ĐUỔI KHÍ
Loại bỏ càng nhiều không khí ra khỏi túi càng tốt trước khi cấp đông.
Không khí có 79% nitơ, sẽ hóa lỏng ở nhiệt độ đông lạnh. Nếu bong bóng khí lớn xuất hiện trong quá trình đông lạnh, nitơ có trong bong bóng này có thể giãn nở nhanh chóng trong quá trình rã đông trong khi túi vẫn còn giòn và gây ra đủ áp suất cục bộ để làm vỡ túi.
LÀM KHÔ BỀ MẶT TÚI:
Trước khi tiến hành đông lạnh túi CryoStore, hãy đảm bảo rằng bề mặt túi và hộp cassette đã khô hoàn toàn. Độ ẩm có thể gây ra sự kết dính giữa túi và cassette làm cho việc tháo túi ra khỏi cassette khó khăn.
SỬ DỤNG ĐÚNG CASSETTE
Việc sử dụng cassette bảo vệ trong quá trình bảo quản luôn được khuyến khích.
Nếu cassette không đúng kích cỡ hoặc lồi lõm làm biến dạng túi, nguy cơ vỡ túi sẽ tăng lên rất nhiều. Một cassette nhỏ có thể kẹp chặt túi và một cassette lớn có thể cho phép túi trượt xung quanh, cả hai đều có thể dẫn đến vỡ túi. Việc sử dụng túi Overwrap của OriGen có thể giúp giữ túi được bảo vệ và ở đúng vị trí.
THẬN TRỌNG KHI THAO TÁC
Hầu hết các vấn đề vỡ túi xảy ra trong quá trình vận chuyển hoặc khi xử lý sản phẩm đông lạnh. Khi bị đông lạnh dưới -60°C, EVA hoạt động giống như một tấm kính và có thể nứt nếu tác dụng đủ lực. Cẩn thận để tránh va đập khi tháo, vận chuyển, xếp lại mẫu và rã đông tất cả các túi đông lạnh.
SỬ DỤNG ĐÚNG CHẤT BẢO VỆ
Các loại tế bào khác nhau và các chất bảo vệ lạnh khác nhau có thể hoạt động khác nhau và thực sự giãn nở ra trong quá trình đông lạnh. Chúng trải qua một số thay đổi pha khác nhau trong quá trình giảm nhiệt độ xuống nhiệt độ LN và sự giãn nở cũng xảy ra trong giai đoạn này.
Việc sử dụng đúng chất bảo vệ lạnh giúp duy trì tính nhất quán trong quá trình xử lý mẫu của bạn.
HIỂU RÕ VỀ SỰ TRAO ĐỔI CHẤT CỦA TẾ BÀO
Đây là một trong những điều khó khăn nhất trong tất cả. Nếu tế bào đang phát triển tích cực ngay trước khi đông lạnh, chúng sẽ thải ra rất nhiều CO2. CO2 sẽ hóa lỏng và sau đó đóng băng ở -78°C (“Băng khô”), thể tích túi bị giảm đột ngột khi CO2 chuyển từ thể khí sang thể rắn.
Khi túi đông lạnh được làm nóng trên -78°C, CO2 đột ngột chuyển thành khí và tăng thể tích khoảng 1000 lần. Áp suất khí bên trong túi khiến túi bị nứt nếu vẫn còn đóng băng hoặc phát nổ với tiếng ‘POP’ nếu chất liệu túi được làm ấm. Cả hai trường hợp này đều đã xảy ra.
