Lựa Chọn Dung Dịch Ly Tâm Phân Tách Gradient Tỷ Trọng
Ly tâm phân tách gradient tỷ trọng là kỹ thuật dựa trên tỷ trọng khác nhau của các tế bào trong một mẫu không đồng nhất. Mẫu được xếp lớp trên môi trường phân tách gradient tỷ trọng trước khi được ly tâm. Trong quá trình ly tâm, mỗi loại tế bào sẽ lắng xuống điểm đẳng tích của nó, đó là vị trí trong môi trường gradient tỷ trọng, nơi tỷ trọng của tế bào và môi trường bằng nhau.
Các ứng dụng phổ biến của phương pháp ly tâm phân tách gradient tỷ trọng:
Phân tách các tế bào đơn nhân máu ngoại vi, loại trừ tế bào chết ra môi trường nuôi cấy tế bào và tách huyết tương khỏi tế bào máu.
Các loại dung dịch ly tâm phân tách gradient tỷ trọng:
Có một số dung dịch phân tách gradient tỷ trọng và mỗi loại có các đặc tính riêng biệt phù hợp cho các mục đích ứng dụng khác nhau. Cụ thể như sau:
- Lymphoprep™, Lympholyte® và Ficoll-Paque® là những môi trường tương tự với thành phần bao gồm saccharide và sodium diatrizoate; chúng có mật độ 1,077 g/mL. Những môi trường này thường được sử dụng để phân tách các tế bào đơn nhân từ máu ngoại vi, máu cuống rốn và tủy xương.
- Percoll® (mật độ: 1,131 g/mL) bao gồm các hạt silica dạng keo được phủ polyvinylpyrolidone (PVP) và được sử dụng rộng rãi để tách tế bào, bào quan, vi rút và các phần tử dưới tế bào khác.
- OptiPrep™ là một môi trường bao gồm iodixanol trong nước được sử dụng để phân tách vi rút, bào quan, đại phân tử và tế bào.
Ly tâm phân tách gradient tỷ trọng là một kỹ thuật phân tách tế bào không đắt tiền nhưng có tính đặc hiệu hạn chế, độ tinh khiết thấp và thông lượng thấp. Ngoài ra, mặc dù nó là một kỹ thuật phòng thí nghiệm phổ biến, nhưng ly tâm gradient tỷ trọng có thể là một quá trình chậm và tốn nhiều công sức, khó thành thạo. Các nhà khoa học thường cần cẩn thận xếp lớp mẫu của họ trên môi trường gradient tỷ trọng, ly tâm trong 30 phút không phanh sau đó cẩn thận thu thập và rửa lớp tế bào với môi trường thích hợp. Các công nghệ như SepMate™ làm cho phương pháp này trở nên dễ dàng và nhanh chóng hơn. SepMate™ là một ống chuyên dụng cho phép người dùng nhanh chóng tạo lớp máu trên môi trường phân tách gradient tỷ trọng, ngăn không cho các lớp trộn lẫn và tạo điều kiện thu hoạch tế bào đích nhanh chóng và dễ dàng. Với SepMate™, các tế bào có thể được lấy trong vòng 15 phút.
