Lựa Chọn Máy Đếm Tế Bào Phù Hợp Với Loại Tế Bào
Các loại tế bào có thể được đếm với các máy đếm tế bào khác nhau
Máy đếm tế bào dựa trên trường sáng (Brightfield-Based Cell Counter)
Dựa trên trường sáng, máy đếm tế bào định lượng bằng cách nhuộm các tế bào chết bằng thuốc nhuộm trypan blue, do các tế bào này đã bị vỡ màng tế bào (lớp ngoài cùng của tế bào), trypan blue sẽ thấm qua và làm các tế bào này có màu xanh đậm, tế bào sống không bắt màu nhuộm.
Một nhược điểm của sự lựa chọn này là không thể dùng với các mẫu tế bào chứa mảnh vụn và các thành phần tạp khác. Khi dùng trypan blue, thuốc nhuộm không chỉ nhuộm tế bào mà còn nhuộm luôn các chất khác và coi chúng là tế bào chết, dẫn đến kết quả không chính xác. Vì vậy, điều quan trọng là sử dụng các mẫu tế bào không có mảnh vụn. Với giới hạn này, các mẫu được sử dụng phổ biến nhất cho trường sáng là các dòng tế bào thuần (cell line).
Dòng tế bào (cell lines) là gì? – Nói một cách đơn giản, các dòng tế bào là quần thể các tế bào đã được cấy chuyền từ các tế bào sơ cấp và được giữ để duy trì trong cùng một điều kiện trong quá trình cấy chuyền liên tục. Do đó, không có mảnh vụn hoặc các thành phần tạp khác, giúp cho việc đếm tế bào bằng máy đếm tế bào dựa trên trường sáng dễ dàng và chính xác hơn nhiều.
Một số ưu điểm và nhược điểm của dòng tế bào thuần:
Ưu điểm | Nhược điểm |
|
|
Các dòng tế bào (cell lines) hay được sử dụng như:
- HeLa cells: tế bào bất tử đầu tiên của con người
- HEK 293 (human embryonic kidney-derived epithelial cells): tế bào biểu mô có nguồn gốc từ phôi thai người
- CHO (Chinese hamster ovary): tế bào buồng trứng của chuột hamster Trung Quốc
- Jurkat (human lymphoblast cells): tế bào lympho T người
- SF9: (pupal ovarian tissue cells from fall armyworm): tế bào mô buồng trứng sâu
Một số dòng máy đếm tế bào tự động bằng phương pháp trypan blue:
| EVE PLUS – máy đếm tế bào tự động nhanh nhất thế giới | EVE HT – máy đếm tế bào tự động thông lượng cao | |
 |  | |
Thời gian phân tích | < 1 giây (chế độ lấy nét thủ công) < 10 giây (chế độ lấy nét tự động) | 3 phút cho 48 test |
Phạm vi đo | 1×104 – 2×107 tế bào/mL | 1×104 – 2×107 tế bào/mL |
Kích thước tế bào | 5 – 60 mm | 5 – 80 mm |
Máy đếm tế bào dựa trên thuốc nhuộm huỳnh quang (Fluorescence Cell Counter)
Đối với thuốc nhuộm huỳnh quang, hầu hết các tế bào có nhân đều có thể được sử dụng để định lượng số lượng tế bào. Không chỉ các dòng tế bào (cell lines) mà cả các tế bào sơ cấp (primary cells) cũng có thể được sử dụng bất kể sự tồn tại của các mảnh vụn hoặc thành phần tạp khác.
Tế bào sơ cấp là gì? – Các tế bào sơ cấp là các tế bào được lấy trực tiếp từ mô sinh vật sống. Có hai loại tế bào sơ cấp khác nhau là tế bào bám dính và tế bào huyền phù. Cả hai loại này đều được sử dụng nhiều cho nghiên cứu, trong đó tế bào bám dính được dùng nhiều trong xét nghiệm tế bào học (cytology), tế bào huyền phù được dùng nhiều trong sản xuất protein quy mô lớn.
Một số tế bào sơ cấp thường được sử dụng:
- Các tế bào biểu mô (Epithelial cells)
- Nguyên bào sợi (Fibroblasts)
- Tế bào sừng (Keratinocytes)
- Tế bào hắc tố (Melanocytes)
- Tế bào nội mô (Endothelial cells)
- Tế bào cơ (Muscle cells)
- Tế bào tạo máu (Hematopoietic cells)
- Tế bào gốc trung mô (Mesenchymal stem cells)
Tế bào bám dính
Các tế bào phát triển gắn liền với bề mặt nuôi cấy | Tế bào huyền phù
Các tế bào trôi nổi trong môi trường |
Một số ưu và nhược điểm khi dùng tế bào sơ cấp:
Ưu điểm | Nhược điểm |
|
|
Thiết bị đếm tế bào tự động dựa trên huỳnh quang:
Thời gian phân tích | < 25 giây |
Thuốc nhuộm | Acridine Orange (AO)/ Propidium Iodide (PI) |
Loại tế bào | Dòng tế bào (cell lines), PBMCs, tế bào gốc mô mỡ, tế bào sơ cấp, …. |
Phạm vi đo | 5×104 – 2×107 tế bào/mL |
>> Xem thêm các công cụ đếm tế bào khác: Đếm & Phân tích tế bào
Link bài viết gốc:
