Đơn vị tế bào gốc máu cuống rốn với liều lượng CAO có ý nghĩa gì?

Mục đích chính của ngân hàng máu cuống rốn là để xử lý máu cuống rốn và lưu trữ đơn vị tế bào gốc máu cuống rốn (CBU) có chất lượng cao nhất để sử dụng trong điều trị trong tương lai.

• Bác sĩ cấy ghép luôn cố gắng tìm kiếm CBU có tế bào cao nhất thực hiện đơn vị để mang lại cho bệnh nhân của bạn cơ hội ghép thành công cao nhất.
• Ngân hàng máu cuống rốn công cộng - Đang tìm cách lưu trữ và cung cấp các CBU với liều lượng tế bào cao. Điều này sẽ giúp tăng khả năng lựa chọn được CBU phù hợp của các bác sĩ ghép.
• Ngân hàng máu cuống rốn tư nhân mong muốn cung cấp một dịch vụ xử lý và lưu trữ máu cuống cho khách hàng tiềm năng của họ một CBU đạt chất lượng cao nhất để có thể sử dụng trong tương lai của họ hoặc người thân.

Hình: Ví dụ về túi lưu trữ đông lạnh 1 đơn vị máu cuống rốn (CBU) đạt tiêu chuẩn & chất lượng cao.

Các chỉ tiêu TNC, MNC, CD34+ và CFU của một đơn vị máu cuống là gì? Tại sao người sử dụng/ người gửi nên quan tâm?

Đây là tất cả các cách đếm các loại tế bào và chúng cho bạn biết liệu việc thu thập và gửi máu cuống rốn của bạn có nhiều tế bào gốc hay không và chúng có khỏe mạnh hay không?

Tế bào gốc là tế bào đơn nhân (MNC): khi quan sát tế bào đơn nhân dưới kính hiển vi chỉ có một nhân. Thật không may, một trong những khía cạnh khó khăn nhất của sinh học tế bào gốc là bạn không thể xác định một tế bào gốc chỉ bằng quan sát dưới kính hiển vi. Vì có những loại tế bào máu khác cũng là tế bào đơn nhân (MNC), chẳng hạn như tế bào hồng cầu có nhân. Bằng chứng duy nhất để xác định một tế bào là tế bào gốc khi tế bào này có chức năng tăng sinh và biệt hóa.

Các nhà khoa học đã làm việc trong nhiều năm để phát triển các chất nhuộm khác nhau có ái lực cao với tế bào gốc. Marker (dấu ấn) được biết nhiều nhất đối với tế bào gốc tạo máu là chúng cho kết quả dương tính với CD34, một loại protein được tìm thấy trên bề mặt tế bào gốc. Tuy nhiên, đếm số lượng CD34+ không phải là phương pháp đếm chính xác số tế bào gốc: kết quả đếm CD34+ khác nhau giữa các phòng lab, chúng có thể khác nhau trong một phòng lab và chỉ có 1-2% tế bào đơn nhân (MNC) có CD34+ thực sự là tế bào gốc.

Tổng số tế bào có nhân (TNC) thường được đếm sau khi xử lý máu cuống rốn. Ưu điểm chính của dữ liệu TNC là số đếm này có độ lặp lại cao trong và giữa các phòng thí nghiệm, do đó TNC có thể được sử dụng chính xác ở các ngân hàng tế bào gốc máu cuống rốn. Để chính xác hơn, tổng số tế bào có nhân (TNC) có thể được đếm tự động bằng thiết bị Flow cytometry phân tích dòng chảy tế bào.

Hiện tại, nuôi cấy và đếm cụm tế bào (CFU - Colony Forming Units) được coi là phương pháp xét nghiệm CFU (CFU assay) tốt nhất để đánh giá khả năng sống và biệt hóa của tế bào gốc máu cuống rốn. Tổng số tế bào có nhân (TNC) bao gồm tế bào sống và tế bào chết.

Trong xét nghiệm CFU, một mẫu nhỏ của đơn vị tế bào gốc tạo máu được nuôi cấy (nuôi cấy trong môi trường bán lỏng chuyên dụng có chứa các nhân tố sinh trưởng và interleukin trong thời gian 2-3 tuần), đánh giá xem liệu tế bào gốc có biệt hóa và hình thành khuẩn lạc hay không bằng phương pháp soi đếm thủ công trên kính hiển vi quang học.

Hiện nay, phương pháp xét nghiệm CFU đã được chuẩn hóa với công nghệ hình ảnh tế bào và đếm CFU tự động.

Trong xử lý và lưu trữ máu cuống rốn, chỉ tiêu TNC hay MNC quan trọng hơn trong đánh giá chất lượng đơn vị máu cuống rốn (CBU)?

Tầm quan trọng của số lượng MNC (số lượng tế bào đơn nhân): Tế bào gốc hiện diện trong phần MNC và là chỉ báo chất lượng của đơn vị tế bào gốc máu cuống rốn (CBU) tốt hơn số lượng TNC (tổng số tế bào có nhân). Số lượng MNC cao tương quan với khả năng ghép tốt hơn và tỷ lệ tử vong thấp hơn.

Sự chênh lệch giữa lưu trữ máu cuống rốn (CBU) toàn cầu hiện tại và tiêu chí lựa chọn của CBU để ghép tế bào gốc tạo máu vẫn là mối quan tâm lớn ảnh hưởng đến tính bền vững của ngân hàng máu cuống rốn. Yêu cầu về chỉ số TNC (tổng số tế bào có nhân) phải đạt cao hơn, nhằm gia tăng giá trị sử dụng của các đơn vị máu cuống rốn (CBU) được lưu trữ, đặc biệt là so với các nguồn tế bào khác. Khả năng sống của TNC bị ảnh hưởng không tốt do nhiễm tế bào hồng cầu (RBC), tuy nhiên, ngân hàng không yêu cầu phải báo cáo/ công bố mức RBC. Việc giảm lượng RBCs hơn nữa là có thể sử dụng công nghệ hiện tại với nguy cơ cũng làm giảm số lượng TNC, tuy nhiên, chúng ta phải suy nghĩ xem liệu đơn vị CBU có lượng RBC “cực thấp” có hoạt động tốt hơn các CBU có lượng RBC cao (và TNC cao hơn) của chúng hay không? Câu trả lời cho câu hỏi này có thể không bao giờ được trả lời do sự trưởng thành và quán tính xung quanh sự thúc đẩy TNCs cao. Ngoài ra, chúng ta cũng nên đặt câu hỏi về các tiêu chuẩn hiện tại để xác định tỷ lệ sống của tế bào. Khi bảo quản trước đông lạnh được báo cáo / đăng ký, các phương pháp như PI và 7AAD không định lượng được một cách đáng tin cậy các tế bào chuyển hóa tích cực và khả thi về mặt chức năng; các phương pháp thẩm thấu thuốc nhuộm không đánh giá được đầy đủ các tổn thương tinh vi hơn dẫn đến quá trình chết không thể phục hồi.

Mặc dù việc lựa chọn đơn vị máu cuống rốn (CBU) để ghép theo quy ước được liên kết với lượng TNC cao, các thông số liên quan hơn như MNCs và tế bào CD34+ dự đoán tốt hơn thời gian mọc ghép và tỷ lệ tử vong liên quan đến cấy ghép (TRM - Transplant Related Mortality) so với thông số TNC. Vậy tại sao ngành ngân hàng máu cuống rốn lại tiếp tục đặt giá trị cao như vậy vào thông số TNC khi đánh giá CBU, đồng thời loại bỏ tầm quan trọng của các yếu tố dự đoán thực sự về kết quả ghép và khuyến khích việc lựa chọn sai các CBU để cấy ghép? Việc giáo dục các bậc cha mẹ tương lai (người gửi mẫu hoặc hiến tặng máu cuống rốn) và các trung tâm cấy ghép để lựa chọn dựa trên các tế bào MNC và CD34+ có thể là cách duy nhất để khuyến khích sự thay đổi trong ngành ngân hàng nhằm điều chỉnh các thông số đăng ký của họ cho phù hợp hơn với tiềm năng thực sự của CBU. Để thúc đẩy lĩnh vực cấy ghép tế bào gốc máu cuống rốn, các tiêu chuẩn chất lượng liên quan đến các tế bào gốc và tế bào gốc có chức năng và khả thi chứ không chỉ số lượng trống phải được theo đuổi và cải tiến liên tục để đảm bảo tính an toàn, độ tinh khiết, hiệu lực và tính nhất quán của mỗi CBU.

Nguồn tài liệu tham khảo:

1. A. Scaradavou, et al., New York Blood Center – NYBC.
2. Cord Blood: Establishing a National Hematopoietic Stem Cell Bank Program (2005).
3. Parent's Guide to Cord Blood.